Información Básica.
No. de Modelo.
KA15901H
Uso específico
Para Propósito Biológica, Grado Técnico, Análisis Pro
Contenido
Comparación
Uso
Reactivos de Diagnóstico
Fuente
Los reactivos importados
Denominación Hábito
Medicina Química
Aplicación
Industria, Investigación Científica, Salud, Protección del Medio Ambiente, Agricultura
Propiedad
Reactivo orgánico
Paquete de Transporte
caja de espuma
Especificación
10 prueba
Marca Comercial
kwinbon
Origen
China
Código del HS
38229000
Capacidad de Producción
520000000kit al año
Descripción de Producto
Kit de inmunoensayo enzimático competitivo para
Análisis cuantitativo de Matrina y Oximatrina (MT&OMT)
Análisis cuantitativo de Matrina y Oximatrina (MT&OMT)
1. Antecedentes
Matrine y Oximatrine (MT&OMT) pertenecen a los alcaloides picricos, una clase de insecticidas alcaloides vegetales con efectos de intoxicación por tacto y estómago, y son biopesticidas relativamente seguros. A principios del año 2021, los países de la UE han notificado repetidamente que se detectó Oximatrine en la miel exportada de China, y que se denegó la entrada de los productos de la miel en el país. Por lo tanto, es necesario controlar el contenido de este medicamento.
Este kit es una nueva generación de productos de detección de residuos de fármacos desarrollados por la tecnología ELISA, que tiene las ventajas de una sensibilidad rápida, sencilla, precisa y alta en comparación con la tecnología de análisis instrumental, y el tiempo de funcionamiento es de solo 75 minutos, lo que puede minimizar el error de operación y la intensidad de trabajo.
2. Principio de prueba
Este producto adopta el método ELISA de competencia indirecta, el antígeno de acoplamiento se prerecubre en la tira de microtitulación de la placa enzimática, El residuo de Matrina y Oximatrina en la muestra competirá con el antígeno de acoplamiento prerecubierto en la tira de microtitulación de la placa enzimática para el anticuerpo de Matrine y Oximatrine. Después de añadir el conjugado enzimático, el color se desarrollará con el sustrato de TMB, el valor de absorbancia de la muestra y su contenido de los residuos Matrine y Oximatrine se correlacionarán negativamente, y luego se compararán con la curva estándar, Y luego multiplicar el número de diluciones por los residuales correspondientes, que pueden derivarse de los residuales correspondientes contenidos en Matrina y Oximatrina.
3. Aplicaciones
Este kit puede usarse para el análisis cuantitativo y cualitativo de Matrina y Oximatrina en miel.
4. Reacciones cruzadas
Matrine.............................. …100%
Oximatrine…............................. …82%
Sophocarpine............. …...... …122%
Sophoridina............................ 78%
5. Materiales necesarios
5,1 equipos:
----espectrofotómetro para placas de microtitulación (450nm/630nm)
----Homogenizador (o estomago)
--------------
---- mezclador vórtex
---- centrífuga
----equilibrio analítico (inductancia: 0,01g)
----tubo de centrifugación de poliestireno: 2mL,10ml
----Micropipetas: 20uL-200ul,
100ul-1000ul, 250ul-multipipeta
5,2 reactivos:
----agua desionizada
6. Componentes del kit
- Placa de microtitulación con 96 pocillos recubiertos de antígeno
- SOLUCIONES estándar DE MT&OMT×5 botellas: (1ml/botella)
0ppb, 0,2ppb, 0,6ppb, 1,8ppb, 5,4ppb
- Solución patrón de agujas: (1ml/botella) 1ppm
- Conjugado enzimático 12ml .........................tapón rojo
- Solución de anticuerpo 7ml .....................green cap
- Solución sustrato A 7ml ........ tapa blanca
- Solución sustrato B 7ml …..........
- Detener la solución 7ml ..........................tapa amarilla
- 20× solución de lavado concentrada 40ml
- 2× dilución de muestra concentrada 50ml
7. Preparación de reactivos:
Solución 1: Dilución de la muestra
Diluir la dilución de 2×muestra con agua desionizada en la proporción de volumen de 1:1.
Solución 2: Solución de lavado
Diluir la solución de lavado concentrada de 20× con agua desionizada en la proporción de volumen de 1:19, que se utilizará para enjuagar la placa. Esta solución puede conservarse a 4ºC durante 1 meses.
8. Preparación de la muestra
8,1 Aviso y precauciones antes de la operación:
(A) por favor, use puntas de una sola vez en el proceso de experimento, y cambie las puntas cuando absorba diferentes reactivos.
b) Asegúrese de que todos los instrumentos experimentales estén limpios.
c) el reactivo derivado puede conservarse a 2-8ºC durante un año;
D) mantener las muestras no tratadas en congelación;
8,2 muestra de miel
----pesar 1,0±0,05g de la muestra en un tubo de poliestireno 10ml;
----Añadir 2ml agua desionizada, vórtice durante 5 minutos con un vórtex
----introducir 50 μL en un tubo de centrifugación de poliestireno de 2 ml y añadir 450 μL de solución diluida de muestra (solución 1) y mezclar a fondo.
----tomar 50 μL para el ensayo
9. Proceso de ensayo
9,1 Aviso antes del ensayo:
9.1.1 Asegúrese de que todos los reactivos y micropocillos estén a temperatura ambiente (20-25ºC).
9.1.2 Volver todos los reactivos restantes a 2-8ºC inmediatamente después de su uso.
9.1.3 el lavado correcto de los micropocillos es un paso importante en el proceso de ensayo; es el factor vital para la reproducibilidad del análisis ELISA.
9.1.4 Evite la luz y cubra los micropocillos durante la incubación.
9,2 pasos del ensayo:
9.2.1 saque todos los reactivos a temperatura ambiente (20-25ºC) durante más de 30min, agítelo suavemente antes de su uso.
9.2.2 saque los micropocillos necesarios y devuelva el resto a la bolsa de cierre a 2-8ºC inmediatamente.
9.2.3 la solución de lavado diluida debe ponerse a temperatura ambiente antes de su uso.
9.2.4 número: Numerado cada posición de micropocillos y todos los patrones y muestras deben ser analizadas por duplicado. Registre las posiciones de las muestras y los estándares.
9.2.5 Añadir solución patrón/muestra y solución de anticuerpos: Añadir solución patrón o solución de muestra 50μl al pocillo correspondiente. Añada 50uL solución de anticuerpos por pocillo, mezcle suavemente agitando la placa manualmente e incube durante 30min 25ºC con la cubierta.
9.2.6 lavar: Retirar la tapa suavemente y verter el líquido de los pocillos y enjuagar los micropocillos con 250µl de solución de lavado diluida (solución 2) en el intervalo de 10s durante 5 veces. Absorba el agua residual con papel absorbente.
9.2.7 Añada el conjugado enzimático: Añada 100uL de la
Conjugado enzimático por pocillo, mezclar suavemente agitando la placa manualmente e incubar durante 30min 25ºC con la tapa. Retire y repita el lavado (paso 6).
9.2.8 coloración: Añadir 50µl solución A y 50µl solución B a cada pocillo. Mezclar suavemente agitando la placa manualmente e incubar durante 15min a 25ºC con la tapa (ver 12,7).
9.2.9 medida: Añadir 50µl de la solución de parada a cada pocillo. Mezclar suavemente agitando la placa manualmente y medir la absorbancia a 450nm (se sugiere medir con la doble longitud de onda de 450/630nm. Leer el resultado en 5min después de añadir la solución de parada).
10. Resultados
10,1 Porcentaje de absorbancia
Los valores medios de absorbancia obtenidos para los patrones y las muestras se dividen por el valor de absorbancia del primer patrón (patrón cero) y luego se multiplican por 100%. El patrón cero se hace así igual al 100% y los valores de absorbancia se citan en porcentajes.
=
B --absorbancia del patrón (o muestra)
B0 --absorbancia de patrón cero (0ppb)
10,2 curva estándar
----para trazar una curva estándar: Tomar el valor de absorbancia de los patrones como eje y, semi logarítmico de la concentración de la solución patrón MT&OMT (ppb) como eje X.
---- la concentración de MT&OMT de cada muestra (ppb), que puede leerse a partir de la curva de calibración, se multiplica por el factor de dilución correspondiente de cada muestra seguida, y se obtiene la concentración real de la muestra.
Por favor note:
Se ha desarrollado un programa informático para el análisis de datos, que puede proporcionarse a petición.
Factor de dilución de las muestras........... …..30
11. Sensibilidad, precisión y precisión
Sensibilidad de la prueba: 0,2ppb
Límite de detección.................... ….. 10ppb
Precisión:
Miel...... …100±30%
Precisión:
El coeficiente de variación del kit ELISA es inferior al 10%.
12. Aviso
12,1 los valores medios de absorbancia obtenidos para los patrones y las muestras se reducirán si los reactivos y las muestras no se han regulado a temperatura ambiente (20-25ºC).
12,2 no permita que los micropocillos se sequen entre pasos para evitar una reproducibilidad incorrecta y opere el siguiente paso inmediatamente después de tocar el soporte de micropocillos.
12,3. Agite cada reactivo suavemente antes de usarlo.
12,4 no use los kits desfasados. No cambie los reactivos de diferentes lotes, o de lo contrario caerá la sensibilidad.
12,5 mantener los kits ELISA a 2-8ºC, no congelar. Selle las placas de micropocillos de reposo, evite la luz solar directa durante todas las incubaciones. Se recomienda cubrir las placas de microtitulación.
12,6 la solución sustrato debe abandonarse si se vuelve de color.los reactivos pueden volverse malos si el valor de absorbancia (450/630nm) del patrón cero es inferior a 0,5 (A450nm<0,5).
12,7 la reacción de coloración necesita 15min después de la adición de la solución A y la solución B; pero puede prolongar el tiempo de incubación a 20min o más si el color es demasiado ligero para ser determinado., nunca exceder 25min, por el contrario, acortar el tiempo de incubación adecuadamente.
12,8 la temperatura de reacción óptima es de 25ºC. Una temperatura más alta o más baja producirá cambios en los valores de sensibilidad y absorbancia.
13. Condiciones de almacenamiento y período de almacenamiento
Condiciones de almacenamiento: 2-8ºC.
Período de almacenamiento: 12months.